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- 英文名称：IL-8 (Human) ELISA Kit
- 品牌：EnkiLife
- 产地：中国
- 型号：96T
- 货号：EH10047
- 价格： ￥2200/盒
- 发布日期： 2024-12-03
- 更新日期： 2025-05-22
| 产地 | 中国 |
| 保存条件 | 按照说明书存放 |
| 品牌 | EnkiLife |
| 货号 | EH10047 |
| 用途 | |
| 检测方法 | 夹心法 |
| 保质期 | |
| 适应物种 | Human |
| 检测限 | 4.68pg/mL |
| 数量 | |
| 英文名称 | IL-8 (Human) ELISA Kit |
| 包装规格 | 96T |
| 标记物 | |
| 样本 | |
| 应用 | |
| 是否进口 | 否 |
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◤反应原理(Test Principle):
本试产品采用双抗体夹心ELISA法。用抗Human IL-8抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的Human IL-8会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗Human IL-8抗体和HRP酶标记的亲和素,抗Human IL-8抗体与结合在包被抗体上的Human IL-8结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在HRP酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,Human IL-8浓度与OD450 OD值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中Human IL-8的浓度。
◤存储(Storage):
Store the product at 2-8°C before unopened. Upon receipt, unpack promptly and store as recommended in the instructions. |
◤关键信息(Key Features):
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◤实验过程(Assay Procedures):
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◤精密度(Precision):
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Intra-assay precision (intra-assay precision): Low, medium, and high levels of Human IL-8 were measured on a single plate 20 times at each level. Inter-assay Precision (interassay precision): Samples containing low, intermediate, and high levels of Human IL-8 were assayed 20 times per plate on 3 different plates. |
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◤回收率(Recovery):
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Three different levels of Human IL-8 spiked in samples were evaluated for recovery in different matrices. |
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◤组份清单(Component List):
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ELISA样本处理常见问题解答
1. 样本数量
问：试剂盒能检测多少个样本？
答：
96T试剂盒：
标准品和样本都做单孔，最多检测88个样本；标准品做复孔，样本做单孔，最多检测80个样本；标准品做单孔，样本做复孔，最多检测44个样本；标准品和样本都做复孔，最多检测40个样本。
48T试剂盒：
标准品和样本都做单孔，最多检测40个样本；标准品做复孔，样本做单孔，最多检测32个样本；标准品做单孔，样本做复孔，最多检测20个样本；标准品和样本都做复孔，最多检测16个样本；如果做3复孔，检测的样本数量会相应减少。
2. 高脂样本处理
问：如何处理高脂样本？
答： 建议5000xg离心，静置10min后取中层较澄清液体，再用≥5000xg离心取中下层清液用于检测。原因：高脂样本含有脂肪，使得样本溶液不呈均质状态，若直接上样会影响抗原抗体的结合，导致测值不准确。
3. 常用匀浆方法
问：如何进行组织/细胞样本的匀浆？
答： l
玻璃匀浆器匀浆：
适用范围：适用于柔软的组织如脑组织或细胞培养物。
方法：将组织称重，剪碎呈1cm3大小，倒入玻璃匀浆管中，加入匀浆介质，左手持匀浆管将下端置于冰浴中，右手将匀浆器的活塞垂直插入套管中，进行上下或前后的匀浆操作。匀浆次数通常为10-20次，每次匀浆后可以让组织稍微恢复形状，以便进行下一次匀浆，直至组织充分匀浆；
手工匀浆：
适用范围：适用于少量样本的处理。
方法：将组织称重，剪碎呈1cm3大小，倒入研钵中，加入液氮进行研磨，充分研磨后，加入匀浆介质，再将制好的匀浆吸取到EP管中备用。
组织研磨仪匀浆：
适用范围：适用于高通量样本处理。
方法：将组织称重，剪碎呈1cm3大小，然后装入EP管，加入匀浆介质。组织研磨仪在低温条件下，60 Hz，90 s研磨1-3次，直至组织充分匀浆。皮肤、肌肉组织及植物组织等可适当增加匀浆次数。
4. 冻融操作
问：如何进行组织/细胞样本的反复冻融？
答： l
组织样本：研磨后于-80℃冷冻1小时或液氮中30分钟，然后在30℃水浴中轻微振荡使其快速融化，重复1-2次。
细胞样本：按上述冻融的操作重复冻融2-3次。若为膜蛋白可超声辅助破碎，但需要控制好超声的温度和频率。
样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂。常规推荐：PMSF。
5. 超声操作
问：如何进行超声操作？
答： 使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞
（超声参数设置参考：用Soniprep150超声波发生器以振幅14μm超声处理30秒，破碎细胞；或者用超声破碎仪，200W，2秒/次，间隙3秒，总时间3-5分钟或者400A，5秒/次，间隙10秒，反复3-5次）。
于2-8℃，以1500×g离心10分钟，去除细胞碎片，收集上清液。
注意：超声过程中注意控制温度；超声探头不要触及容器底部或壁。
6. 裂解液使用
问：可以使用商品化/自配的裂解液吗？
答： 不建议使用，因为不同品牌的成分和裂解效率可能存在显著差异。特别是含有SDS等表面活性剂的试剂，可能会破坏目标蛋白的天然结构，导致检测结果的准确性降低，甚至产生假阴性。此外，引入新的溶剂可能带来未知的基质干扰，增加背景噪声，进而影响测量值的可靠性。
7. 样本保存
问：样本应如何保存？
答： 样品收集后若在48内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物，室温混匀后使用。
