细胞冻存液是用于冻存保存细胞的溶液，其目的是为了在低温下保护细胞并在液氮中长期储存细胞。本公司开发的细胞冻存液内含多种细胞保护剂、沉降稳定剂，可以有效的在冻存和复苏过程中保护细胞，同时极大的减少了冻存和复苏过程步骤及操作要求。 与传统冻存液相比，无需繁琐费时的程序冻存步骤或价格高昂的程序降温仪，可直接重悬细胞后置于-80℃，次日转移到液氮完成整个冻存过程，节省大量的时间和精力。

使用说明

（一）细胞冻存

1. 细胞冻存前将细胞培养至状态和密度合适，建议冻存前 4-8h 换液一次以保证细胞生长状态；

2. 贴壁细胞需要用胰酶消化后收集细胞悬液，悬浮细胞直接收集细胞悬液；

3. 细胞悬液 1000rpm 离心 5min，弃上清；

4. 细胞沉淀物用对应体积的冻存液重悬，使细胞密度在 1x10^6-5x10^6个/mL 之间（具体细胞冻存密度可以根据自身需要调整）；

6. 将重悬好的细胞按 0.5mL-1mL 每管分装于标记好的冻存管中，拧紧瓶盖；

7. 将冻存管直接至于-80℃冰箱中过夜， 天转入液氮罐长期保存；

（二）细胞复苏

1. 准备 37℃温水，将所需的完全培养基置于水浴锅中预热 30min 后开始复苏；

2. 将细胞从液氮罐取中出，立即放入37℃水浴锅中快速解冻(操作时切勿使水浸没冻存管口，以免造成细胞污染)融化至米粒大小冰块取出；

3. 将冻存管以离心力 150g(约 900rpm)左右离心 1-2min，不同离心机具体转速会有差异；

4. 离心完成后弃去冻存液，用预热的培养基缓慢加入冻存管，并轻柔重悬细胞后接种至 T25 或者 10cm 皿

5. 摇晃培养器皿，使细胞分布均匀后静置于37℃、饱和湿度细胞培养箱中培养，后序根据细胞状态，继续培养或换液，或者传代处理；

注意事项

1、使用本产品时应注意无菌操作，避免污染。

2、冻存细胞分装至冻存管后，应减少在室温或4℃存放时间，请尽快移入到-80℃超低温冰箱

3、建议对每个细胞每个批次进行冻存实验检测，以确保储存的活性正常。

4、本产品仅供科研使用，不可应用于临床诊断和医疗等。