试剂盒介绍

EnkiLife 小分子荧光染料标记试剂盒包含标记抗体蛋白的多个组分，如高性能的荧光染料，纯化用超滤离心管，标记缓冲液等，可轻松可靠地标记抗体、蛋白质。

本试剂盒优势：

快速：标记时间仅需约30分钟，同时兼顾标记效果和标记效率。

简便：每只染料试剂已经优化设计好对应的抗体量，无需繁琐计算，固体染料形式批次稳定，按照步骤进行操作可得到较好效果。

灵活：大规格的试剂盒中提供的染料进行了分装，批次性能一致，方便多次标记使用。

试剂盒规格

小分子荧光染料标记抗体原理

在一定pH范围内，荧光染料活化基团专一性与抗体蛋白上的伯氨基反应，形成稳定的酰胺键，从而实现与抗体蛋白的偶联。

标记步骤（适用于标记20μg~40μg抗体）

1. 抗体样本超滤浓缩换液步骤： 取20μg~40μg待标记抗体于超滤管滤芯中，并加入不超过超滤管滤芯最大体积的标记缓冲液，14000 × g 离心3~5 分钟，弃去滤液；可以重复此步骤3次，最后一次超滤完成得到20~30μL，将超滤管滤芯倒置于收集管中，14000 × g 离心1 分钟，收集得到20~30μL抗体溶液。将滤芯中补加适量1×PBS，保持湿润。

2. 将溶解后的Cyanine5.5  1μL全部加至上述20~30μL抗体溶液中，并轻轻吹打混匀。密封盖好盖子，放入37 ℃恒温箱中避光温育 30 分钟。

3. 弃去滤芯中缓冲液，将标记混合物再转入滤芯中，补足1×PBS至500μL，14000 × g 离心3~5 分钟，弃去滤液，重复此步骤3~5次至收集管中滤液几乎透明。

4. 将超滤管滤芯倒置于另一个收集管中，14000 × g 离心1分钟。收集管中得到的溶液，即为Cyanine5.5标记的抗体。（注：如需进行标记效果的DOL计算评估，请参阅附录说明，且在加入标记蛋白保存液之前进行）。

5. （可选）向标记后的抗体中加入适量标记蛋白保存液，4℃保存或分装后-20 °C保存（也可不加蛋白保存液使用低吸附管子分装后-20 °C保存），避免反复冻融，可稳定保存6个月以上。