![]() |
- 品牌:EnkiLife
- 产地:中国
- 型号:1mL
- 货号:RE80028
- 价格: ¥1280/盒
- 发布日期: 2025-06-20
- 更新日期: 2025-06-20
产地 | 中国 |
品牌 | EnkiLife |
货号 | RE80028 |
用途 | 抗体标记,蛋白标记 |
包装规格 | 1mL |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
产品简介
牛血清白蛋白(BSA)通常会作为一种有效的稳定剂添加到纯化的抗体中。但是,当标记抗体时,BSA会成为阻碍,因为它直接与抗体竞争结合相关化学偶联物,因而会降低标记效率。因此在采用某些标记方法时,必须去除BSA。常见的商业BSA去除技术可能涉及许多费力的步骤,如蛋白A/G 或抗原亲和纯化,分子排阻纯化或其他纯化方法,需要的条件及成本都较高。
EnkiLife的抗体中BSA去除试剂盒采用一种简单的方法,只需10~15分钟,可有效地将BSA与抗体分开。纯化后的抗体无需置换缓冲液,可直接用于后续还原抗体的标记操作,或对接EnkiLife的各种标记试剂盒产品。本试剂盒适用于各物种的IgG抗体亚型。
产品特点
- 操作简便快捷,无需复杂仪器设备耗材,整个过程最少仅需10min。
- 纯化效果较好,可以去除95%以上的BSA。
- 适用的抗体浓度及BSA浓度较广,抗体含量低至50μg,BSA含量高达0.5%(5mg/mL)都有较好效果。
产品组分
组分 | 规格 | 储存温度 |
试剂一 | 1mL/管×1 | 2~8℃ |
1× PBS (pH7.4) | 2mL/管×1 | 2~8℃ |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 2~8℃保存一年。
操作过程
实验前准备
1. 仔细阅读使用说明书。
2. 提前20 分钟从冰箱中取出试剂盒,使试剂盒各组分平衡至室温,试剂一可能有沉淀较难完全溶解,可在37℃水浴锅或温箱加热10分钟使其溶解。
3. 如果 BSA 浓度较高,则用去离子水或蒸馏水稀释抗体混合液直到 BSA 浓度达到或低于 0.5%。
4. 试剂盒抗体样本适用性如下表:
抗体溶液中所含组分 | 试剂盒兼容性 |
明胶 | 否,使用其他纯化方法纯化抗体 |
甘油>15% | 否,用去离子水或蒸馏水稀释抗体至甘油浓度达到或低于15% |
含BSA> 0.5%(5mg/mL) | 否,用去离子水或蒸馏水稀释抗体至 BSA 浓度达到或低于 0.5% |
含die氮钠,Tris,甘氨酸,Proclin ,EDTA,海藻糖,蔗糖,或其他小分子添加物,盐离子等 | 是,可作为缓冲液置换使用 |
6.0 | 是,超出此范围可适当补加酸碱缓冲液进行调节或联系我司技术 |
操作步骤
1. 若试剂一未完全溶解,将试剂一13000×g 离心1分钟,保留其上清使用。按照每100μL抗体溶液(抗体样本符合适用性标准)加入80μL 试剂一比例直接加入,混匀后室温孵育5min。
2. 将以上混合物13000×g 室温离心5分钟,后可见离心管底部小团白色沉淀,迅速小心吸取上清至另一微量离心管,4℃暂时存放至后续实验成功,底部的小团白色沉淀即为分离纯化的抗体。
注:抗体量较小时,白色沉淀难以观察到,因此将离心管放置在离心机上时,留意离心管方向及最终的离心管底位置,以便观察及进行后续吸取上清的操作。
3. 根据原始取用的抗体量及需要的抗体浓度估算需要加入的1×PBS (pH7.4)或其他缓冲液的体积以重悬抗体白色沉淀,分装后-20℃或-70℃保存抗体,或者根据实际需求使用标记缓冲液重悬抗体进行后续的标记步骤。
注意事项
1. 本产品仅供科研使用。
2. 纯化后的抗体可对接Enkilife 标记试剂盒产品实验步骤。
3. 本试剂盒所指抗体类型为IgG 抗体类型,未进行 IgM、IgA、IgD、IgE、IgY 或其他重组抗体、抗体片段的测试,不同抗体类型纯化效果可能会有所差别。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验纯化效果展示
|
SDS-Page 非还原胶电泳检测纯化效果 1、离心分离后沉淀复溶(纯化的兔二抗) 2、离心分离后上清 (BSA) 3、混合了BSA的抗体(10μL,5mg/mLBSA+1mg/mL兔二抗) 4、对照BSA (5mg/mL,10μL) 5、对照原始抗体 (1mg/mL, 10μL) |