染料特点：

PerCP-Fluor680是一种串联荧光染料，由PerCP和Fluor680结合而成，最大吸收波长485nm左右，最大发射光675nm左右，和PerCP-Cy5.5光谱类似，可相互替代，Fluor680染料替换Cy5.5后标记一些抗体可降低和某些细胞的非特异性结合，改善应用效果，增强染料稳定性，主要用于多色流式细胞术，免疫荧光等。

技术原理：通过共价键将PerCP（供体）与合成染料F680（受体）连接，利用荧光共振能量转移（FRET） 实现信号转换

本试剂盒优势：

l 活化染料具备加长臂: 特殊设计的加长柔性臂，有效避免抗体和荧光染料间的空间位阻，保护抗体活性同时，获得更高标记效率。

l 定向偶联: 优化的定向偶联技术，标记抗体的均一性较好，且提高标记效率。

l 快速：步骤简单，最快3~4h即可完成高效标记。

l 染料稳定：优选高性能荧光染料，稳定性高，不易降解，适应后续多种应用场景，如固定样本的检测。

l 操作简便：每只染料试剂已经优化设计好对应的抗体量，无需繁琐计算，抗体样本符合标记条件情况下无需超滤，固体染料形式批次稳定，按照步骤混合相应试剂，进行简单操作可得到较好效果。

l 灵活：大规格的试剂盒中提供的染料进行了分装，批次性能一致，方便多次标记使用。

l 实验试剂全覆盖：配备标记保存液，从标记到保存全流程无需额外配备试剂，一个盒子搞定全部标记过程，省心，省事。

试剂盒规格

标记原理

主要应用场景

标记步骤（适用于标记20μg~40μg抗体）

1. 抗体样本超滤浓缩换液：取待标记抗体如20μg（纯度>90%），于超滤管滤芯中，并加入不超过超滤管滤芯最大体积的标记缓冲液，14000 × g 离心5 分钟，弃去滤液；根据抗体中含有添加物情况可以重复此步骤1次，最后一次超滤完成得到20~30μL，将超滤管滤芯倒置于收集管中，14000 × g 离心1 分钟，收集得到的抗体溶液，根据抗体总量适当补足标记缓冲液至抗体浓度为1mg/ml。同时再将滤芯中补加适量1×PBS，保持湿润。

注：若待标记的抗体浓度大于2mg/mL，且不含杂质成分时（如抗体缓冲液为PBS），直接使用标记缓冲液稀释抗体至1mg/mL；

2. 抗体活化：按照20μg抗体加入0.5μL 抗体活化试剂的比例对抗体进行活化， 轻轻混匀后37℃反应60分钟。

3. 染料和抗体偶联：将1管活化的染料（每管标记20μg~40μg抗体）加入10μL标记缓冲液，移液器吸打或者涡旋混匀溶解后直接加入至修饰后的抗体溶液中，37℃避光反应1.5h或4℃避光过夜反应。

4. 封闭保存：在300μg 封闭试剂管中加入30μL DMSO 混匀溶解，后按照20μg抗体加0.6μL 封闭试剂，混匀后37℃避光反应30分钟，封闭未反应完的活性基团。此时反应完成，根据后续应用需求选择性添加抗体保存液至合适浓度（一般要求抗体浓度不小于0.2mg/mL，4℃避光保存，请勿冻存，一般可稳定保存半年以上。

具体操作以说明书为准！