产品介绍

dsDNA Quantification Reagent (Green)是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品,这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术:cDNA文库的构建、亚克隆的DNA片段纯化及应用,比如进行DNA定量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量的检测方法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,而且这种方法不灵敏(5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1)。dsDNA Quantification Reagent (Green)定量检测方法简单、方便,成为生物制品残留DNA检测的标准。

dsDNA Quantification Reagent (Green)只有与dsDNA结合后才发出荧光,并且所发荧光强度与DNA浓度成正比。dsDNA Quantification Reagent (Green)可以检测出25 pg/mL-1000 ng/mL范围内的dsDNA,且线性关系较好(R2>0.99)。

基本信息

dsDNA Quantification Reagent (Green)激发/发射波长:480/520nm

试剂制备

(1)dsDNA Quantification Reagent (Green)定量试剂是以1 mL的浓缩液形式保存在无水的DMSO(二甲基亚砜)中。实验时,配制2×PicoGreen工作液:将浓缩液用1×TE(10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 7.5)按1:200的比例稀释。对于终体积为200 μL的检测体系,如需准备足够20个样品测定的工作液,可在1.99 mL 1×TE中加入10 μL dsDNA Quantification Reagent (Green);对于终体积为2 mL的检测体系,如需准备足够20个样品测定的工作液,则需要在19.9 mL 1×TE中加入100 μL dsDNA Quantification Reagent (Green)浓缩液。由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。dsDNA Quantification Reagent (Green)见光易降解,因此要注意避光保存。

(2)溶液最好在配制好数小时内使用,以保证最佳结果。

备注:该试剂仅供科研使用!