产品介绍

线粒体膜电位降低是细胞早期凋亡的一个标志,它发生在细胞膜上的磷酯酰丝氨酸外翻与Caspase 水解酶激活之前。当线粒体膜通透性发生改变时,膜电位会降低。这种膜电位的改变是由于 Bax 二聚体的形成和 Bid, Bak, Bad 的激活,从而诱导线粒体膜形成孔隙造成的。当这些促凋亡蛋白被激活时,线粒体同时也将细胞色素 C 释放到细胞质中。

JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电位△ Ψm 的理想荧光探针,它可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-1 聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-1 不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1 为单体,可以产生绿色荧光。通过 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到膜电位的下降,同时也可以用 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

JC-1 单体的最大激发波长为 510 nm,最大发射波长为 527 nm;JC-1 聚合物的最大激发波长为 585 nm,最大发射波长为 590 nm。本试剂盒操作简单快速,可以通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪进行检测,同时提供了CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。

基本信息

JC-1激发/发射波长①:550/600nm

JC-1激发/发射波长②:485/535nm

产品组分

注意事项

1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2. 为避免反复冻融,可对本产品进行小量分装。

3. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

4. JC-1(100× in DMSO)在较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以 20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

5. 配制 JC-1 染色工作液时,必须先把试剂盒提供的 JC-1(100× in DMSO)用灭菌 diH2O 充分溶解混匀后,才可以加入 10× Assay Buffer。不可先配制 1× Assay Buffer 再加入 JC-1(100× in DMSO),这样JC-1 会很难充分溶解,会严重影响后续的检测。

6. JC-1 染色完成后用 1× Assay Buffer 洗涤时,使1× Assay Buffer 保持 4℃左右,此时的洗涤效果较好。

7. JC-1 染色并洗涤完成后尽量在 30 分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。

备注:该试剂仅供科研使用!