产品介绍

DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)本身无荧光,可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的酯酶水解,形成 DCFH,DCFH 无荧光且不能通透细胞膜,从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的 DCF。根据活细胞中荧光的产生,可以判断细胞ROS的含量和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察,是一种经典的组织或活细胞中活性氧检测方法。Rosup 为活性氧阳性诱导药物,根据其荧光信号强度,可分析活性氧的真正水平。

基本信息

产品激发/发射波长:504/529nm

产品内容

注意事项

1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2. 为避免反复冻融,可对本产品进行小量分装。

3. 阳性对照 Rosup 一般使用浓度为 100 μM(推荐浓度 100-400 μM,具体依细胞类型而定)。通常刺激后 30 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。

4. 实验过程中,如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照 1:2000-1:5000 稀释 DCFH-DA,使 DCFH-DA 的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间也可以根据情况在15-60 min 内适当进行调整。

5. 活性氧阳性对照(Rosup)仅仅用于作为阳性对照的样品,并不是在每个样品中都需加入活性氧阳性对照。

6. 探针装载后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。

备注:该试剂仅供科研使用!