人皮肤癌细胞A2058

一、细胞起源

1. 组织来源：A2058细胞系源于人皮肤恶性黑色素瘤的淋巴结转移灶，属于侵袭性较强的黑色素瘤模型[1][2]。

2. 遗传背景：携带BRAF V600E突变（约80%黑色素瘤常见驱动突变），导致MAPK信号通路持续激活，促进肿瘤增殖[3][4]。

二、生物学特性

1. 增殖与凋亡：

高增殖率，对BRAF抑制剂（如Vemurafenib）敏感，但易产生耐药性[2][4]。

凋亡途径依赖caspase激活，且Stat3信号阻断可诱导p53依赖性凋亡[5][6]。

2. 迁移与侵袭：

高转移潜能，依赖MMP-1/2/9降解细胞外基质，侵袭I型胶原需成纤维细胞旁分泌因子（如MMP-3）激活[7]。

上皮-间充质转化（EMT）标志物（TWIST、SLUG）上调，增强转移能力[2][8]。

3. 信号通路：

MAPK（BRAF/MEK/ERK）和PI3K/AKT通路持续活化，驱动恶性表型[1][4]。

耐药株（A2058R）中CD271、SOX10等干细胞标志物表达升高[2]。

代谢特征：耐药株糖酵解增强，磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1（PEPCK1）上调，促进化疗抵抗[2]。

三、培养与储存

1. 培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S，37℃、5% CO?培养[9]。

2. 冻存条件：30%基础培养基+60%FBS+10%DMSO，液氮保存[9]。

3. 鉴定要点：需定期检测BRAF V600E突变状态及STR分型，避免交叉污染[4]。

四、研究应用领域

1. 药物筛选平台：

用于BRAF/MEK抑制剂（如Dabrafenib/Trametinib）疗效评估[4][10]。

天然化合物（如Hispidulin、芫花酯甲）的抗增殖、抗迁移活性测试[12][14]。

2. 转移机制研究：

模拟肿瘤-微环境互作（如成纤维细胞共培养），研究MMPs介导的侵袭[7]。

EMT及耐药机制探索[2][8]。

免疫治疗模型：联合免疫检查点抑制剂（如PD-1抗体）的协同效应评估[4]。

五、近几年研究进展（2020–2024）

1. 克服耐药性：

Alantolactone通过抑制STAT3/Oct4/Sox2通路，逆转A2058对MAPK抑制剂的耐药性[10]。

3-巯基丙酸靶向抑制PEPCK1，恢复BRAF抑制剂敏感性[2]。

2. 天然化合物治疗：

Bornyl cis-4-羟基肉桂酸酯抑制FAK/PI3K/AKT和MAPK通路，阻断EMT及转移[8]。

Hispidulin诱导G0/G1期阻滞及ROS依赖性凋亡[14]。

微环境调控：胚胎干细胞微环境下调PI3K/AKT通路，抑制A2058恶性行为[1]。

六、局限性与克服方法

1. 局限性：

体外培养丧失肿瘤微环境复杂性，难以模拟体内耐药[2]。

遗传漂变可能导致实验结果不稳定[1]。

2. 克服方法：

开发3D培养或类器官模型，整合微环境因素[10]。

联合多组学分析（如单细胞测序）解析异质性[2]。

七、总结与展望

A2058细胞系是研究黑色素瘤转移、耐药及靶向治疗的关键模型。未来需：

1. 深入探索微环境与肿瘤互作的新靶点（如代谢重编程）[2][10]。

2. 开发基于CRISPR的基因编辑技术，构建更精准的耐药模型。

3. 推动天然化合物与免疫治疗的联合应用[8][14]。

参考文献

1. Embryonic stem cell microenvironment suppresses the malignancy of cutaneous melanoma cells by down‐regulating PI3K/AKT pathway. Wang C, et al. Journal of Cellular Physiology. 2019;234(8):13859-13876. [PMID: 30548608]

2. Overcoming chemoresistance to b-raf inhibitor in melanoma via targeted inhibition of phosphoenolpyruvate carboxykinase1 using 3-mercaptopropionic acid. Ren M, et al. Molecular Therapy - Oncolytics. 2022;24:449-461. [PMID: 35118191]

3. Mutations of the BRAF gene in human cancer. Davies H, et al. Nature. 2002;417(6892):949-952. [PMID: 12068308]

4. Current Advances in the Treatment of BRAF-Mutant Melanoma. Patel H, et al. Cancers. 2020;12(2):483. [PMID: 32066501]

5. Restored expression of the atypical heat shock protein H11/HspB8 inhibits the growth of genetically diverse melanoma tumors through activation of novel TAK1-dependent death pathways. Smith CC, et al. Cell Death & Disease. 2012;3(8):e371. [PMID: 22825471]

6. Role of Stat3 in Regulating p53 Expression and Function. Niu G, et al. Molecular and Cellular Biology. 2005;25(17):7432-7440. [PMID: 16107695]

7. A Novel Host/Tumor Cell Interaction Activates Matrix Metalloproteinase 1 and Mediates Invasion through Type I Collagen. Benbow U, et al. Journal of Biological Chemistry. 1999;274(36):25371-25376. [PMID: 10464252]

8. Bornyl cis-4-Hydroxycinnamate Suppresses Cell Metastasis of Melanoma through FAK/PI3K/Akt/mTOR and MAPK Signaling Pathways and Inhibition of the Epithelial-to-Mesenchymal Transition. Yang TY, et al. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2018;66(29):7666-7672. [PMID: 29989397]

9. 人皮肤癌细胞A2058 说明书. 武汉恩玑生命科技有限公司.

10. Alantolactone enhances the sensitivity of melanoma to MAPK pathway inhibitors by targeting inhibition of STAT3 activation and down-regulating stem cell markers. Zhao K, et al. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2024;174:116505. [PMID: 38770977]

11. 李思蒙,等. 芫花提取物及单体化合物体外抗肿瘤活性的初步筛选研究. 中国中药杂志. 2012;37(21):3255-3260.

12. Anti-Proliferative and Anti-Migratory Activities of Hispidulin on Human Melanoma A2058 Cells. Chang CJ, et al. Molecules. 2021;26(13):3908. [PMID: 34209367]