TSA多重荧光染色 EnkiLife?vs Quanterix
发表时间：2026-03-05
TSA 多重荧光染色试剂盒实验流程是基于酪胺信号放大（TSA）技术：利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应（即荧光标记的酪胺盐在 HRP催化 H2O2下形成共价键结合位点），产生大量的酶促反应，该产物能与周围的酪氨酸残基结合，在抗原-抗体结合部位形成大量的荧光素沉积，实现信号放大。
每种酪胺均标记有光谱特性不同且光稳定性良好的荧光基团，可实现抗体结合 → HRP 介导放大 → 荧光沉积的迭代循环，从而完成多重标记。
TSA 多重荧光染色试剂盒适用于相同来源一抗的多重免疫荧光标记，也可用于不同来源抗体的多重免疫荧光标记。
一、TSA试剂盒适用范围于产品组分对比
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对比参数 |
EnkiLife TSA 六标七色多重荧光染色试剂盒（mIHC）(Cat#:RA10012) |
Quanterix Opal 7-Color Manual IHC Kit (Cat#: NEL811001KT) |
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样本适用范围 |
福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片 |
是 |
是 |
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冰冻切片 |
是 |
否 |
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细胞爬片 |
是 |
否 |
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细胞涂片 |
是 |
否 |
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类器官等组织样本 |
是 |
否 |
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实验步骤（石蜡切片） |
所需试剂 |
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1.脱蜡 |
自备 |
自备 |
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2.抗原修复 |
自备 |
10X AR6 buffer |
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3.内源性酶阻断 |
3% H2O2 |
10X AR6 buffer |
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4.封闭 |
封闭液 |
Blocking/Ab Diluent |
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5.一抗孵育 |
自备一抗+一抗稀释液 |
自备一抗+Blocking/Ab Diluent |
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6.二抗孵育 |
HRP‐山羊抗兔/鼠 IgG |
Opal polymer HRP Ms+Rb |
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7.孵育 TSA 试剂 |
TSA-CY3 |
Opal 520 Fluorophore工作液（使用前需每管 Opal 荧光团用 75 μL DMSO复溶；每次实验前，将复溶后的 Opal 荧光团用 1X Plus Amplification Diluent 配制成工作液） |
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8.抗体洗脱 |
抗体洗脱剂 |
10X AR6 buffer |
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9.重复步骤3-8，直至完成所有靶标检测，每个靶标使用不同的荧光素。 |
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10.DAPI 染核 |
DAPI 染液 |
Spectral DAPI solution |
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11.封片 |
抗荧光淬灭封片剂 |
自备 |
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二、TSA试剂盒荧光素对比（EnkiLife TSA多重荧光染色试剂盒各荧光通道可根据客户想要的颜色定制）
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EnkiLife TSA 六标七色多重荧光染色试剂盒（mIHC）(Cat#:RA10012) |
Quanterix Opal 7-Color Manual IHC Kit(Cat#:NEL811001KT) |
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荧光素名称 |
激发波长(nm） |
发射波长(nm） |
显微镜下颜色 |
荧光素名称 |
激发波长(nm） |
发射波长(nm） |
显微镜下颜色 |
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TSA-430 |
430 |
480 |
青色(Aqua通道) |
Opal 520 |
494 |
525 |
Green |
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TSA-FITC |
490 |
520 |
绿色(FITC通道) |
Opal 540 |
523 |
536 |
Yellow |
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TSA-CY3 |
550 |
570 |
橙红色(CY3通道) |
Opal 570 |
550 |
570 |
Red |
|
TSA-594 |
590 |
620 |
红色(Red通道) |
Opal 620 |
588 |
616 |
Amber |
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TSA-680 |
680 |
700 |
深红色(CY5/CY5.5通道) |
Opal 650 |
627 |
650 |
Orange |
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TSA-CY7 |
750 |
780 |
深红色(CY7通道) |
Opal 690 |
676 |
694 |
Clear |
三、EnkiLife TSA多重荧光染色技术服务案例分析
示例图片：
测试样本：大鼠肾脏
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AQP4：在内髓集合管的主要细胞、皮质和外髓集合管中可见到阳性染色。
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CD31：广泛用于标记血管内皮；表达于肾小球毛细血管内皮和各级血管中。
-
TGFβ1：表达在高血压和纤维化模型中显著上调；可在肾小球上皮细胞（主要是足细胞）和间质成纤维细胞中检测到。
-
ZO-1：作为一种紧密连接的支架蛋白，它维持了肾小球滤过屏障和管状上皮极性。
-
Collagen I：在纤维化或硬化模型中，它广泛地积累在间质和肾小球中。
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指 标 |
荧光素 |
激发波长(nm) |
发射波长(nm) |
滤光片 |
显微镜下颜色 |
图片颜色（定制颜色效果） |
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AQP4 |
TSA-430 |
430nm |
480nm |
Aqua 通道 |
青色 |
黄色 |
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CD31 |
TSA-FITC |
490nm |
520nm |
FITC 通道 |
绿色 |
绿色 |
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TGFβ1 |
TSA-CY3 |
550nm |
570nm |
CY3 通道 |
橙红色 |
红色 |
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Zo-1 |
TSA-594 |
590nm |
620nm |
Red 通道 |
红色 |
青色 |
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Collagen I |
TSA-680 |
680nm |
700nm |
CY5/CY5.5 通道 |
深红色 |
紫色 |
EnkiLife恩玑生命TSA多重荧光染色试剂盒
EnkiLife产品货号
EnkiLife产品名称
RA10012
TSA六标七色多重荧光染色试剂盒（mIHC）
RA10011
TSA五标六色多重荧光染色试剂盒（mIHC）
RA10010
TSA四标五色多重荧光染色试剂盒（mIHC）
RA10009
TSA三标四色多重荧光染色试剂盒（mIHC）
RA10008
TSA双标三色多重荧光染色试剂盒（mIHC）