为什么选Fluor488而不选FITC??|绿色荧光|免疫荧光染色
发表时间：2026-08-18
Fluor488是磺化后的罗丹明绿。通过引入两个磺酸根离子，Fluor488的水溶性大大增强，pH稳定性，光稳定性也提高。和荧光素类染料不同，Fluor488的荧光在较宽的pH范围内(4-10)保持不变。由于带多个负电荷，Fluor488不易分子间聚集，多个染料分子标记同一蛋白时，不易荧光自淬灭(self quenching)，或引起蛋白聚集。
Fluor488是荧光素（FITC或FAM）及CY2的优异替代品，用于生物偶联物单分子检测、荧光相关光谱和荧光偏振测量表现极为突出。在荧光显微镜和流式细胞术也得到广泛应用，Fluor488是目前极佳的水溶性小分子绿色荧光染料之一。
图1: Fluor488SE化学结构示意图，显示其分子组成和键合方式
图2: Fluor488激发和发射光谱图
图3: Fluor488近似染料光谱（Cy2, FITC）对比
图4: 对用Fluor 488染料和异硫氰酸荧光素（FITC）制备的山羊抗小鼠IgG结合物的相对荧光强度进行比较。使用相同抗体量, 结果显示Fluor 488标记的抗体具有更高的荧光亮度。
图5: Fluor488 标记兔抗小鼠 IgG 抗体与 Cy2 标记的兔抗小鼠 IgG 抗体的亮度对比。人血细胞样本先用正常兔血清进行封闭处理，然后与抗 CD3 小鼠单克隆抗体一起孵育，细胞经过洗涤、重悬后，分别与相同浓度的Fluor 488 或 Cy2 标记的兔抗小鼠IgG 二抗一起孵育，红细胞裂解后，流式检测，显示Fluor488 标记的二抗效果更优。
图6: 使用Fluor488和FITC直接标记anti Mouse CD4单抗，使用相同抗体量，流式检测信号强度，Fluor488标记的anti Mouse CD4具有更强的荧光信号强度。
参考文献
1. Bioorthogonal reaction pairs enable simultaneous, selective, multi-target imaging. Karver MR, et al. Angew Chem Int Ed Engl. 2012. [PMID: 22162316]
2. A novel method for reproducible fluorescent labeling of small amounts of antibodies on solid phase. Lundberg E, et al. J Immunol Methods. 2007. [PMID: 17383674]
3. Comparison between photostability of Alexa Fluor 448 and Alexa Fluor 647 with conventional dyes FITC and APC by flow cytometry. Rai S, et al. Int J Lab Hematol. 2018. [PMID: 29575796]
EnkiLife（恩玑生命）小分子荧光染料标记试剂盒
|
染料名称 |
试剂盒货号 |
Ex max/Em max |
产品规格 |
相对荧光亮度 |
荧光颜色 |
|
Cyanine2 |
RE80019 |
490nm/510nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
绿色 |
|
Cyanine3 |
RE80007p |
548nm/563nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
黄色 |
|
Cyanine5 |
RE80008p |
646nm/662nm |
40ug/200ug/2mg |
★★★ |
红色 |
|
Cyanine5.5 |
RE80020 |
675nm/694nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
深红 |
|
Cyanine7 |
RE80021 |
750nm/773nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
深红 |
|
FITC |
RE80001p |
495nm/520nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
绿色 |
|
Fluorescein-X |
RE80022 |
495nm/519nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
绿色 |
|
Fluor350 |
RE80009p |
346nm/445nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
蓝色 |
|
Fluor405 |
RE80010p |
400nm/424nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
紫色 |
|
Fluor430 |
RE80023 |
430nm/545nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
黄绿色 |
|
Fluor488 |
RE80011p |
490nm/513nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
绿色 |
|
Fluor532 |
RE80024 |
530nm/555nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
黄绿色 |
|
Fluor555 |
RE80012p |
555nm/572nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
黄色 |
|
Fluor568 |
RE80025 |
578nm/602nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
橙色 |
|
Fluor590 |
RE80018 |
590nm/620nm |
0.5mg/1.25mg/2.5mg |
★ |
橙色 |
|
Fluor594 |
RE80013p |
590nm/617nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
橙色 |
|
Fluor647 |
RE80014p |
651nm/668nm |
40ug/200ug/2mg |
★★★ |
红色 |
|
Fluor680 |
RE80015p |
680nm/702nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
深红 |
|
Fluor700 |
RE80026 |
702nm/723nm |
40ug/200ug/2mg |
★★ |
深红 |
|
Fluor750 |
RE80017p |
747nm/770nm |
40ug/200ug/2mg |
★ |
深红 |
|
Fluor770 |
RE80016 |
770nm/790nm |
0.5mg/1.25mg/2.5mg |
★ |
深红 |