PBS / TBS / PBST / TBST 缓冲液速查对比

一句话概括：PBS 与 TBS 是两种不同缓冲对的等渗盐溶液，后缀的“T”就是 Tween-20（一种非离子型洗涤剂）。前面两个字决定缓冲体系，后缀决定它是不是洗液。

一、组成关系

Tween-20 的作用是降低非特异性结合，因此含洗涤剂的两个只在“洗”的环节使用，不含洗涤剂的两个用于稀释、封闭与保存。

二、六项指标对比

三、怎么选：两个判断点

1. 要不要洗涤剂？只是稀释抗体、重悬细胞、封闭 → 用 PBS 或 TBS；要洗板、洗膜去除非特异结合 → 加 Tween-20，变成 PBST 或 TBST。

2. 要不要磷酸根？下游是碱性磷酸酶（AP）显色或化学发光，或做磷酸化蛋白相关实验 → 选 TBS 系列。PBS 中的磷酸根会竞争性抑制 AP，也会干扰部分磷酸化抗体的结合。

四、容易踩的坑

    TBS  中的  Tris  是伯胺，会与  NHS-ester 、 BS3 、 DSS  等胺反应型交联剂竞争反应。做交联、抗体偶联、生物素化标记时，必须换回不含胺的  PBS ，否则交联效率会明显下降。

五、实操细节

· 配 10× 母液最省事：4 ℃ 存放，用前稀释成 1×，现配现用。

· Tween-20 要在稀释后再加：直接往浓母液里加会产生大量泡沫，且难以混匀。

· Tween-20 用量：常用 0.05%（v/v）；背景偏高时可升至 0.1%，但过高会洗掉弱结合信号、也会让膜上抗体流失。

· pH 不要随缘：PBS 用 HCl / NaOH 调至 7.4；TBS 用浓 HCl 调至 7.4 – 7.6。pH 偏差最常见的结果是背景偏高或条带偏弱。

· 含 Ca2? / Mg2? 的 PBS 是另一个货号：DPBS 有含与不含二价离子两种，做细胞解离或螯合相关实验时不要混用。

· TBST 不是洗膜的唯一解：磷酸化抗体配 AP 体系用 TBST；常规 ECL 体系 PBST 与 TBST 都能跑，很多实验室的差别只是习惯，而非必需。

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