Phospho-Chk2 (T68) (17G19) 兔单克隆抗体

Phospho-Chk2 (T68) (17G19) 兔单克隆抗体

引言

Chk2（Checkpoint kinase 2）是DNA损伤应答（DDR）通路的核心激酶，其Thr68位点（T68）的磷酸化是ATM激酶激活后的关键事件，标志着DNA损伤信号传导的启动[1][2][3]。Phospho-Chk2 (T68) (17G19) Rabbit Monoclonal Antibody（克隆号17G19）是一种高特异性兔单克隆抗体，广泛应用于检测Chk2在T68位点的磷酸化状态，为研究细胞周期调控、凋亡及癌症机制提供重要工具[4][5][6]。

一、抗体的基础特性

1. 物种与类型

• 兔单克隆抗体，克隆号17G19，通过兔-兔杂交瘤技术制备，具有高亲和力与低批次差异[7]。
• 识别表位：人源Chk2蛋白Thr68磷酸化位点（pT68）[6][8]。

2. 特异性验证

• Western blot（WB）中特异性识别约60 kDa的磷酸化Chk2条带，在Chk2基因敲除细胞中无交叉反应[6]。

二、作用机制：Chk2 T68磷酸化的生物学意义

1. DNA损伤应答的核心事件

• DNA双链断裂（DSB）激活ATM激酶，后者直接磷酸化Chk2的T68位点，触发Chk2二聚体解离及自身磷酸化，进而激活下游通路[1][2]。
• 激活的Chk2磷酸化p53（Ser20），阻断Mdm2介导的p53泛素化降解，稳定p53并诱导细胞周期阻滞或凋亡[9]。

2. 细胞周期调控

• 通过磷酸化Cdc25A，抑制CDK1/2活性，阻滞G1/S或G2/M期进程，确保DNA修复完成[2]。
• 缺失Chk2的小鼠胚胎干细胞表现出G2/M期阻滞缺陷及辐射抵抗[9]。

三、临床应用

1. 癌症研究中的生物标志物

• 肿瘤敏感性预测：Chk2 T68磷酸化水平与PARP抑制剂敏感性正相关，尤其在BRCA突变肿瘤中[10]。
• 治疗靶点探索：在前列腺癌中，Chk2 T68磷酸化抑制可增强砷剂（ATO）联合Venetoclax的凋亡效应[11]；在胶质瘤中，Chk2激活与染色体不稳定性相关[12]。

2. 代谢疾病中的新功能

• 2023年研究发现，Chk2 T68磷酸化参与胰岛素分泌调控，Chk2缺失导致胰岛β细胞功能障碍及葡萄糖稳态失衡[6]。

3. 放化疗疗效监测

• 放疗后肿瘤组织pT68水平升高提示DDR激活，可作为放化疗疗效的动态标志物[13][14]。

四、未来展望

1. 诊断试剂开发

• 将pT68抗体整合至液态活检平台，用于早期癌症筛查或治疗响应监测[12]。

2. 靶向治疗优化

• 开发Chk2磷酸化特异性抑制剂，联合DNA损伤药物（如铂类）增强抗癌效果[13][11]。

3. 技术拓展

• 开发适用于活体成像的标记抗体，实时监测体内DNA损伤应答[6]。

4. 疾病机制深化

• 探索Chk2在神经退行性疾病及代谢综合征中的作用[6]。

结语

Phospho-Chk2 (T68) (17G19) 兔单克隆抗体作为DNA损伤研究的核心工具，不仅深化了对细胞周期调控的理解，更在肿瘤治疗、代谢疾病研究中展现出转化潜力。随着精准医疗的发展，其在个体化治疗中的应用前景广阔。

参考文献

1. DNA damage activates ATM through intermolecular autophosphorylation and dimer dissociation. Bakkenist CJ, et al. Nature. 2003;421(6922):499-502. [PMID: 12556883]

2. The ATM–Chk2–Cdc25A checkpoint pathway guards against radioresistant DNA synthesis. Falck J, et al. Nature. 2001;410(6830):842-844. [PMID: 11298455]

3. The many substrates and functions of ATM. Kastan MB, et al. Nat Rev Mol Cell Biol. 2000;1(3):179-186. [PMID: 11252897]

4. 10-4-4, A Cardiac Glycoside Block Growth in Cancer Cells via Nuclear Receptor Nur77 Mediated Na+/K+-ATPase Endocytosis. Hu M, et al. Front Pharmacol. 2021;12:720868. [PMID: 34721019]

5. The human origin recognition complex is essential for pre-RC assembly, mitosis, and maintenance of nuclear structure. Chou HC, et al. Elife. 2020;9:e57929. [PMID: 327555410]

6. Checkpoint kinase 2 controls insulin secretion and glucose homeostasis. Chong ACN, et al. Nat Commun. 2023;14:7260. [PMID: 37935657]

7. Rabbit monoclonal antibodies: generating a fusion partner to produce rabbit-rabbit hybridomas. Spieker-Polet H, et al. Proc Natl Acad Sci USA. 1995;92(20):9348-9355. [PMID: 7568136]

8. DNA damage induced by human CD40 ligand mutant promotes senescence and induces demethylation of GATA4 in lung cancer. Li Y, et al. Oncol Rep. 2018;39(5):2237-2243. [PMID: 29512714]

9. DNA damage-induced activation of p53 by the checkpoint kinase Chk2. Hirao A, et al. Science. 2000 Mar 10;287(5459):1824-7. [PMID: 10710310]

10. Loss of PPP2R2A inhibits homologous recombination DNA repair and predicts tumor sensitivity to PARP inhibition. Kalev P, et al. Cancer Res. 2012;72(24):6414-6424. [PMID: 23118045]

11. Arsenic trioxide synergistically promotes the antileukaemic activity of venetoclax by downregulating Mcl-1 in acute myeloid leukaemia cells. Cho H, et al. Br J Haematol. 2021;192(2):316-327. [PMID: 33080068]

12. Chromosomal instability induced by increased BIRC5/Survivin levels affects tumorigenicity of glioma cells. Conde M, et al. Oncotarget. 2017;8(70):114928-1149410. [PMID: 293831411]

13. Mithramycin suppresses DNA damage repair via targeting androgen receptor in prostate cancer. Wang S, et al. Oncogene. 2020;39(40):6283-6292. [PMID: 32811990]

14. Survivin safeguards chromosome numbers and protects from aneuploidy independently from p53. Wiedemuth R, et al. Mol Cancer. 2014 May 9;13:107. [PMID: 24886358]