口腔癌研究入门课｜CAL27与HAX1：从模型选择到靶点验证的完整思路

做口腔癌方向的研究，绕不开两个问题：用什么细胞模型，以及在这个模型里研究什么靶点。

这篇把CAL27和HAX1放在一起讲清楚——前者是口腔癌研究里应用最广的细胞系之一，后者是近年来在口腔鳞癌侵袭转移中越来越受关注的蛋白。两者结合，恰好构成一条从模型到机制的完整研究链条。

一、CAL27：为什么它是口腔癌研究的经典模型

1. 来源贴近临床

CAL27建立于1982年，源自一位56岁白人男性舌中段的鳞状细胞癌。

舌癌是口腔癌中最常见、侵袭性也较强的亚型。这意味着CAL27从源头上就贴合口腔癌研究的核心场景，而不是一个泛化的上皮细胞模型。

2. 分子背景匹配

CAL27的分子特征，模拟的是临床上一类预后较差的口腔癌患者：

• HPV阴性：属于HPV阴性头颈鳞癌亚型，这类患者通常预后更差

• TP53突变：口腔鳞癌中最常见的突变之一

• EGFR过表达：头颈鳞癌的经典标志，也是西妥昔单抗等靶向药的靶点

• 角蛋白强阳性：CK5、CK14阳性，保持鳞状上皮特征

换句话说，它的基因背景就是临床上真实存在的那类难治肿瘤。

3. 功能表型全面

CAL27不只是“长得像”口腔癌，它的功能表型也很完整：

• 高致瘤性：接种免疫缺陷小鼠后成瘤率高，能重现晚期头颈鳞癌的病理特征

• 强侵袭性：适合Transwell、划痕、器官型侵袭等实验

• EMT潜能：缺氧或药物压力下，波形蛋白上调、E-cadherin下调

• 增殖明确：倍增时间约45小时，CCK-8、克隆形成实验稳定性好

4. 应用广泛，证据可积累

CAL27被广泛用于药物筛选、耐药机制、信号通路和转移研究。例如有研究用它探索WNT3通过ABCG2介导奥沙利铂耐药，也有研究用它验证CD147敲除对增殖、迁移和侵袭的抑制效果。用的人多，意味着你的结果更容易与领域内其他研究进行比较和验证。

5. 一个需要注意的细节

有研究指出，CAL27在体内形成的移植瘤表现出腺鳞癌特征，而非纯粹的鳞状细胞癌。这意味着在涉及体内成瘤实验时，对组织病理的解读需要更加谨慎。但在体外实验中，它仍被普遍视为口腔鳞癌的代表性细胞系。

二、HAX1：为什么值得在CAL27里敲除

选好了模型，接下来是靶点。HAX1之所以值得在CAL27里研究，核心在于它与口腔鳞癌的迁移侵袭直接相关。

1. HAX1在口腔癌中显著上调

正常口腔上皮中HAX1表达很低，但在口腔鳞状细胞癌组织中，90%的肿瘤样本呈现HAX1中到强阳性表达。

这说明HAX1的高表达不是偶然现象，而是与口腔癌进展密切相关的事件。在CAL27中敲除它，相当于在真实的肿瘤背景里“关掉”这个被癌细胞劫持的蛋白。

2. 机制特异性：直接调控整合素αvβ6的内吞

这是选择CAL27最关键的理由。

2007年发表在Cancer Research上的研究通过酵母双杂交筛选，首次鉴定出HAX-1是整合素β6胞质尾的结合伴侣。

αvβ6在口腔鳞癌中高表达，且与更侵袭性的行为和更差的临床预后相关。HAX-1直接结合β6，调控αvβ6通过网格蛋白介导的内吞。用小干扰RNA敲低HAX-1后，口腔鳞癌细胞中αvβ6依赖的迁移被完全阻断，器官型侵袭实验中的侵袭能力下降约90%。

CAL27作为舌鳞癌细胞系，是研究αvβ6功能的经典模型。在CAL27中敲除HAX1，可以直接检验“HAX1-αvβ6-内吞-侵袭”这条通路在舌癌中的功能重要性。

3. 增殖与侵袭的双重调控

除了迁移侵袭，HAX-1还通过AKT通路调控c-myc表达，进而影响口腔鳞癌细胞的活力和增殖。在同类口腔鳞癌细胞中，HAX-1敲低后细胞活力、增殖和侵袭能力均被显著抑制。

在CAL27中敲除HAX1，可以同时观察它对增殖和侵袭两个维度的综合影响。

4. CAL27作为模型的适用性

CAL27是舌鳞状细胞癌研究中应用最广泛的细胞系之一，具有明确的高侵袭潜能和上皮样形态，且对多种化疗药物有响应。它本身就是研究口腔癌转移和药物筛选的标准工具。在这个背景清晰的模型上做HAX1敲除，结果更容易被领域内理解和比较。

小结：HAX1在口腔癌中高表达，通过结合αvβ6直接驱动迁移侵袭，并通过AKT通路促进增殖。CAL27是研究舌鳞癌侵袭转移的经典模型，因此在其中敲除HAX1，可以系统评估这个蛋白对口腔癌细胞“运动能力”和“生长能力”的双重贡献。

三、敲除后建议优先检测的指标

如果你正在CAL27中做HAX1敲除，以下指标建议优先检测：

四、总结

CAL27和HAX1的组合，本质上是一个“合适模型+合适靶点”的研究设计：

• CAL27提供了贴近临床、分子背景清晰、功能表型全面的口腔癌模型

• HAX1提供了与口腔癌侵袭转移直接相关的机制切入点

• 两者结合，可以系统研究HAX1对口腔癌细胞增殖和侵袭的双重调控

选它，不是跟风，是因为它真的合适。

参考文献

1.Ramsay AG, et al. HS1-associated protein X-1 regulates carcinoma cell migration and invasion via clathrin-mediated endocytosis of integrin alphavbeta6. Cancer Res. 2007 Jun 1;67(11):5275-84. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-07-0318. PMID: 17545607.
2.Gioanni J, et al. Two new human tumor cell lines derived from squamous cell carcinomas of the tongue: establishment, characterization and response to cytotoxic treatment. Eur J Cancer Clin Oncol. 1988;24(9):1445-55. PMID: 3181269.

GUANZHU

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