人急性淋巴母细胞白血病细胞MT-4

人急性淋巴母细胞白血病细胞MT-4

一. 细胞起源与来源

MT-4细胞系源自人急性T淋巴细胞白血病（T-ALL），属于T细胞系来源的淋巴母细胞白血病模型。其免疫表型符合T-ALL特征：CD3阳性（胞质或膜表达），TdT阳性，而CD34和HLA-DR阴性。与其他T-ALL亚型不同，早期T前体淋巴母细胞白血病（ETP-ALL）具有独特的免疫表型积分系统（如CD5、CD8等表达异常），但MT-4不属于此亚型[1]。

二. 生物学特性

1. 形态与生长方式：

l 形态：MT-4细胞呈淋巴母细胞样，圆形。

l 生长方式：通常以悬浮方式生长。部分证据提到其可能存在"悬浮或贴壁"的混合特性，但多数明确为悬浮细胞，实际操作中需离心收集细胞，不可直接倒掉培养液[9]。

2. 遗传变异与信号通路

l NOTCH1突变：>50%的T-ALL存在NOTCH1基因激活突变（异二聚化域或PEST域），导致异常信号传导，促进细胞增殖和存活[2][7]。

l 癌基因协作：SCL和LMO1协同抑制胸腺细胞分化，并与pre-TCR信号共同促使NOTCH1突变累积，形成白血病起始细胞[5]。

l 代谢重编程：依赖氧化磷酸化过度激活，与骨髓微环境互动（如分泌CCL3、TGF-β1）重塑基质细胞，支持白血病进展[10][15]。

3. 表观调控与细胞周期

l SIRT1通路：通过去乙酰化CDK2促进p27泛素化降解，加速细胞周期进程[11]。

l 迁移与耐药：ABL1与Cofilin1相互作用增强细胞迁移；Rack1过表达通过PKCα活化导致化疗耐药[12][13]。

4. 免疫微环境互动

脐带血来源的Helios+ Treg细胞通过CCL22和VEGFA/VEGFR2通路促进血管生成及白血病细胞骨髓浸润[6]。

三. 培养与储存

l 标准培养条件：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S+0.05mM β巯基乙醇。

l 推荐传代比例：3×10^5-5×10^5cells/mL。

l 推荐换液频率：2-3 次/周。

l 储存条件：30% 基础培养基+60%FBS+10%DMSO，液氮保存[9]。

四. 研究应用领域

1. 机制研究：NOTCH信号、代谢重编程、耐药机制的核心模型[5][7][15]。

2. 药物筛选：如白藜芦醇诱导S期阻滞和凋亡[8]；γ-分泌酶抑制剂阻断NOTCH通路[7]；CD47激动肽PKHB1诱导免疫原性死亡[16]。

3. 动物模型构建：转基因过表达（如Ttg-1、IL-7Rα）模拟白血病发生[14][17]。

五. 近几年研究进展（2020–2024）

1. 靶向代谢疗法：抑制线粒体复合物I可逆转NOTCH1驱动的代谢重编程，与化疗协同增效[15]。

2. 免疫微环境靶点：靶向Treg细胞（如抗Helios+）或VEGFR2通路抑制血管生成[6]。

3. 诊断标准更新：2024年中国指南明确ETP-ALL的免疫表型积分系统及分子预后分组[1]。

六. 局限性与克服方法

1. 局限性：

l 细胞系长期传代可能导致遗传漂变[18]。

l 微环境互作在体外难以完全模拟[10]。

3. 克服方法：

l 联合类器官共培养或小鼠PDX模型[10][17]。

l 开发双靶点抑制剂（如NOTCH1+代谢通路）[15]。

七. 总结与展望

MT-4细胞系是研究T-ALL分子机制的核心工具，尤其在NOTCH信号、代谢重编程和微环境互动领域。未来需进一步探索：

1. 精准分型：整合单细胞测序解析异质性[1][3]。

2. 临床转化：推进代谢抑制剂（如复合物I阻断剂）及免疫联合疗法[6][15]。

3. 模型优化：利用CRISPR构建基因编辑模型模拟患者特异性突变[5][17]。

参考文献

1. 王建祥, 等. 中国成人急性淋巴细胞白血病诊断与治疗指南（2024）. 中华血液学杂志. 20210. DOI: 10.3760/cma.j.cn121090-20240410-00201

2. Weng AP, et al. Activating Mutations of NOTCH1 in Human T Cell Acute Lymphoblastic Leukemia. Science. 2004;306(5694):269-271. PMID: 15472075

3. Zhang J, et al. The genetic basis of early T-cell precursor acute lymphoblastic leukaemia. Nature. 2012;481(7380):157-164. PMID: 22237106

4. Ferrando AA, et al. Gene expression signatures define novel oncogenic pathways in T cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Cell. 2002;1(1):75-85. PMID: 12086892

5. Tremblay M, et al. Modeling T-cell acute lymphoblastic leukemia induced by the SCL and LMO1 oncogenes. Genes Dev. 2010;24(11):1093-1106. PMID: 20516194

6. Li X, et al. Umbilical cord blood-derived Helios-positive regulatory T cells promote angiogenesis in acute lymphoblastic leukemia in mice via CCL22 and the VEGFA-VEGFR2 pathway. J Immunol Res. 2019;2019:1-17. PMID: 30897865

7. Liu S, et al. Downregulation of Notch signaling by γ-secretase inhibition can abrogate chemotherapy-induced apoptosis in T-ALL cell lines. Ann Hematol. 2009;88(7):677-688. PMID: 19107443

8. 劳凤学, 等. 白藜芦醇诱导急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞凋亡. 中国药理学通报. 2006;22(3):342-349.

9. 人急性淋巴母细胞白血病细胞MT-4 说明书。武汉恩玑生命科技有限公司。

10. Tirado HA, et al. Metabolic crosstalk between stromal and malignant cells in the bone marrow niche. Leukemia. 2023;37(3):535-548. PMID: 36717601

11. Wang F, et al. SIRT1 regulates the phosphorylation and degradation of P27 by deacetylating CDK2 to promote T-cell acute lymphoblastic leukemia progression. Oncogene. 2021;40(17):3110-3122. PMID: 33820982

12. Luo J, et al. ABL1 and Cofilin1 promote T-cell acute lymphoblastic leukemia cell migration. Biochem Biophys Res Commun. 2021;570:55-61. PMID: 34171574

13. Lei J, et al. Increased PKCα activity by Rack1 overexpression is responsible for chemotherapy resistance in T-cell acute lymphoblastic leukemia-derived cell line. Cancer Chemother Pharmacol. 2016;78(5):1035-1044. PMID: 27679487

14. McGuire EA, et al. Thymic overexpression of Ttg-1 in transgenic mice results in T-cell acute lymphoblastic leukemia/lymphoma. Mol Cell Biol. 1992;12(9):4186-4195. PMID: 1383689

15. Baran N, et al. Inhibition of mitochondrial complex I reverses NOTCH1-driven metabolic reprogramming in T-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Discov. 2022;12(6):1468-1486. PMID: 35320340

16. Uscanga-Palomeque AC, et al. CD47 agonist peptide PKHB1 induces immunogenic cell death in T‐cell acute lymphoblastic leukemia cells. Cancer Immunol Immunother. 2019;68(8):1215-1231. PMID: 31214713

17. Silva A, et al. Overexpression of wild-type IL-7Rα promotes T-cell acute lymphoblastic leukemia/lymphoma. Blood. 2021;138(19):1872-1888. PMID: 33974034

18. Liu C, et al. Automated synthesis of prexasertib and derivatives enabled by continuous-flow solid-phase synthesis. Nat Commun. 2021;12(1):2269. PMID: 33875649