人鼻咽癌细胞系C666-1

人鼻咽癌细胞系C666-1

1. 细胞起源

起源：C666-1源于未分化型鼻咽癌（NPC）组织，是从中国南方患者来源的NPC异种移植瘤（C666）中分离的亚克隆[1]。

EBV携带特性：该细胞系是唯一能长期稳定携带Epstein-Barr病毒（EBV）的NPC细胞系，其EBV基因型（EBV-1型）和潜伏模式（Latency II型）与华南地区NPC原发肿瘤高度一致[1][5]。

2. 生物学特性

（1）EBV相关特征

EBV基因表达：持续表达EBERs（EBV编码小RNA）、EBNA1蛋白及LMP1/LMP2转录本，符合EBV潜伏II型模式[1]。

病毒基因组：全基因组测序显示其EBV序列（171,317 bp）与原发NPC肿瘤高度同源，且存在独特的BZLF1和LMP1突变[5]。

（2）肿瘤干细胞特性

侧群（SP）细胞：C666-1中存在具有自我更新、强致瘤性（裸鼠移植）及高耐药性的SP细胞，细胞因子19（Cytokine 19）可能是其潜在标记物[2]。

CD44+干细胞亚群：CD44+细胞具有更强的成球能力和体内成瘤性，CCR7信号通路参与其干性维持[12]。

（3）分子表型

细胞角蛋白阳性：证实其为上皮源性[1]。

染色体特征：亚二倍体（染色体众数45条），存在结构异常[1]。

耐药机制：高表达ABCG2（化疗耐药）和Smoothened蛋白（放疗抵抗）[2]。

3. 培养与储存

培养条件：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S，37°C、5% CO?[4]。

三维培养：可在超低附着板中形成肿瘤球体，用于模拟肿瘤微环境[13]。

储存条件：30% 基础培养基+60%FBS+10%DMSO[14]。

4. 研究应用领域

EBV致病机制研究：作为EBV持续感染的模型，用于解析病毒潜伏感染与NPC发生的关系[1][5]。

药物筛选平台：用于测试靶向药物（如ICG-001、Berberine、辛伐他汀）的疗效[6][7][9]。

放疗增敏研究：如Tetrandrine通过抑制MEK/ERK通路增强放疗敏感性[8]。

肿瘤微环境模拟：用于研究肿瘤-成纤维细胞互作（如STAT3激活）[7]及外泌体介导的血管新生[10]。

5. 近几年研究进展（2020–2025）

靶向治疗：抑制CBP/β-catenin通路，减少癌症干细胞样细胞，与顺铂联用显著抑制肿瘤生长[6]。

厚朴黄连素（Houttuyn Berberine） ：通过上调circ-SMARCA5/miR-346轴抑制增殖、迁移并诱导凋亡[15]。

耐药机制突破：Flot2通过外泌体miR-23b-3p/ZO-1轴促进血管新生，敲低Flot2可抑制体内外血管生成[10]。

新型模型开发：三维类器官模型优化，提升肿瘤微环境模拟真实性[13]。

6. 局限性与克服方法

（1）局限性：

EBV丢失风险：长期传代可能导致EBV基因组丢失（类似HNE-1细胞系）[3]。

遗传异质性低：亚二倍体特征限制了对NPC基因组复杂性的全面模拟[1][11]。

（2）克服方法：

早期克隆化冻存以维持EBV稳定性[3]。

联合其他NPC细胞系（如HONE-1、HK1）或患者源性异种移植（PDX）模型互补研究[11][13]。

7. 总结与展望

C666-1细胞系因稳定携带EBV的特点，成为研究NPC病毒致癌机制的核心工具。其在靶向治疗（如CBP/β-catenin抑制剂）、放疗增敏及肿瘤干细胞研究中的应用价值突出。未来需进一步：

（1）开发EBV稳定表达工程细胞株，避免传代丢失[5]；

（2）整合多组学分析（如单细胞测序），解析肿瘤异质性[11]；

（3）探索免疫微环境调控机制，如EBV抗原递呈与免疫逃逸[14]。

参考文献

1. Nasopharyngeal carcinoma cell line consistently harbouring Epstein-Barr virus. Cheung ST, et al. Int J Cancer. 1995. [PMID: 10449618]

2. Identification of cancer stem cell-like side population cells in human nasopharyngeal carcinoma cell line. Wang J, et al. Cancer Res. 2003. [PMID: 17440074]

3. Two epithelial tumor cell lines latently infected with Epstein-Barr virus derived from nasopharyngeal carcinomas. Glaser R, et al. Proc Natl Acad Sci USA. 1984. [PMID: 2557601]

4. 人鼻咽癌细胞系C666-1 说明书.武汉恩玑生命科技有限公司.

5. Complete genomic sequence of Epstein-Barr virus in nasopharyngeal carcinoma cell line C666-1. Tso KKY, et al. J Virol. 2012. [PMID: 23903841]

6. Therapeutic targeting of CBP/β-catenin signaling reduces cancer stem-like population in EBV-positive NPC. Chan KC, et al. Sci Rep. 2019. [PMID: 25847468] 

7. Berberine suppresses tumorigenicity of NPC cells by inhibiting STAT3 activation. Tsang CM, et al. Cancer Lett. 20110. [PMID: 24125886]

8. Tetrandrine sensitizes NPC cells to irradiation by inducing autophagy and inhibiting MEK/ERK pathway.  Wang J, et al. J Cancer. 2020. [PMID: 32952943]

9. Inhibitory effect of simvastatin in nasopharyngeal carcinoma cells. Ma Z, et al. Oncol Rep. 2012. [PMID: 30864714] 

10. 颜学军. Flot2通过外泌体miR-23b-3p/ZO-1轴促进鼻咽癌血管新生. 中国癌症杂志. 2023.

11. Characterization and comparison of two NPC cell lines, C17 and C666-1, as models for studying the pathogenesis of nasopharyngeal carcinoma. Makowska A, et al. Biochem Biophys Res Commun. 2025 Jul 30;772:152053. [PMID: 40412368]

12.  CD44+ cancer stem-like cells in EBV-associated NPC. Lun SWM, et al. PLoS One. 2017. [PMID: 23272145] 

13. Modeling nasopharyngeal carcinoma in three dimensions. Sankar PSS, et al. Methods Mol Biol. 2018. [PMID: 28116686] 

14. Monocyte-derived factors including PLA2G7 induced by macrophage-nasopharyngeal carcinoma cell interaction promote tumor cell invasiveness. Low HB, et al. Oncotarget. 2016. [PMID: 27487154]

15. Houttuyn Berberine inhibits NPC progression via circ-SMARCA5/miR-346 axis. Yang D, et al. Phytomedicine. 2022.