解密病理诊断的基础语言 —— H&E 染色
发表时间：2026-10-21组织病理学诊断的核心，是在显微镜下观察细胞形态、组织结构及细胞间相互关系，以此判别组织的正常生理状态或病理改变。新鲜离体组织富含水分，未经处理的组织切片近乎透明，各类细胞与间质结构之间缺乏天然对比度，无法直接镜下观察。H&E 染色通过两种具有选择性着色能力的染料，对组织内不同化学组分进行差异化标记，构建稳定、可重复、全球通用的组织显色体系。所有外科活检、手术切除标本，原则上均先行 H&E 染色切片观察；免疫组织化学、特殊染色、分子病理检测等技术，均建立在 H&E 切片形态学评估的基础之上。因此 H&E 染色并非一项简单的着色操作，而是病理领域通用的形态学语言。
H&E 染色不是单一的染色步骤，而是一套连续的组织制备与染色工艺，从组织块到最终可镜检的玻片，分为组织前处理、切片、染色、封片四大阶段。
离体组织迅速放入固定液（常规为 10% 中性缓冲福尔马林），目的是快速交联组织内蛋白质，终止细胞自溶，保存细胞与间质原始形态，防止组织腐败变形。固定的质量直接决定后续切片与染色效果。
固定后的组织块内含大量水分，水与石蜡不相溶。依次使用梯度乙醇脱去组织内水分；再用二甲苯等透明剂置换乙醇，使组织透光、呈透明状态；随后将组织浸入熔融石蜡，冷却固化形成石蜡包埋块。石蜡块可长期保存，便于反复切片。
石蜡块固定于轮转切片机，切成厚度约 3?5 μm 的超薄组织薄片；薄片漂浮于温水水面展平，再用洁净载玻片捞起，置于温箱烘烤，使组织牢固粘附在玻片上，防止染色过程中组织脱落。
石蜡不溶于水，染色前必须脱蜡：玻片依次经过二甲苯脱蜡，梯度乙醇由高到低置换二甲苯，最后进入蒸馏水，使组织回到水环境，才能进行水溶性染料染色。
? 苏木素染色：玻片浸入苏木素染液，染色时间根据苏木精的类型和浓度而定。
? 分化：使用盐酸酒精溶液，去除细胞核中过多的苏木精染料，使细胞核的染色更加清晰。
? 返蓝：弱碱性水溶液（氨水 / 碳酸锂）处理，使细胞核呈现出更鲜艳的蓝色。
? 伊红染色：切片浸入伊红染液，染色时间根据伊红的浓度而定。
? 梯度乙醇脱水：去除组织内水分。
? 二甲苯透明，中性树胶封片：加盖盖玻片，隔绝空气，永久保存切片。
H&E 染色由两种染料协同完成，二者靶向目标具有明确区分：苏木素主要标记细胞核；伊红主要标记细胞质、细胞外基质及其他蛋白性结构。二者着色的选择性，根源并非染料对结构的 “物理吸附”，而是基于电荷的化学结合，对应病理学中经典的嗜碱性、嗜酸性概念。
天然苏木素本身几乎无色，不具备直接染色能力。染色过程中，苏木素经氧化反应生成苏木红，再与铝盐媒染剂（常规使用明矾）结合，形成带正电荷的有色金属络合物。细胞核内富含脱氧核糖核酸（DNA），DNA 分子的磷酸骨架携带大量负电荷。依据静电相互作用原理，带正电的苏木红?铝络合物可与带负电的核酸牢固结合，最终呈现稳定的蓝色。
染色质、核仁、染色体均富含核酸，因此着色深浅存在差异：浓缩染色质颜色更深，常染色质相对浅淡；核仁因含有大量 RNA，同样呈蓝紫色。病理医生依靠核的大小、形态、染色质分布、核仁数量及核分裂象，可以判断细胞是否存在异型性。
伊红为酸性染料，在染色体系中解离后，染料离子携带负电荷。细胞质、胶原纤维、平滑肌纤维、红细胞、基底膜等结构主要成分为蛋白质。在 HE 染色的 pH 条件下，蛋白质多肽链上的氨基基团发生质子化，带有正电荷，带负电的伊红阴离子通过静电引力可与蛋白结合。
伊红本身为红色系染料，与蛋白组分结合后呈现粉红色。不同结构的蛋白种类、蛋白密度存在差异，因此粉色具有层次区分：胶原纤维呈明亮淡粉红色，平滑肌纤维为深粉红色，红细胞内血红蛋白可被伊红染成鲜亮的猩红色。这种色彩梯度，可以区分不同类型的细胞外基质，识别纤维化、出血、肌组织增生等病变。
经完整流程制备的 HE 切片，在光学显微镜下呈现一套层次分明的色彩图景，可直观区分各类组织组分：
细胞核（DNA/RNA），包括上皮细胞、炎症细胞、肿瘤细胞的细胞核；细菌、部分钙化灶也可呈嗜碱性着色。
? 细胞质：不同细胞胞质着色深浅不一；
? 细胞外基质：通常呈较明显的粉红色至红色；
? 红细胞：特征性鲜红色；
? 角蛋白、肌纤维：不同程度红染。
经过 H&E 染色的组织切片，形成一套标准化的色彩编码体系：蓝紫色信号代表核酸富集的细胞核，用于定位细胞、评估核形态；不同层次的粉红色信号代表蛋白类的胞质与间质，勾勒细胞轮廓、细胞排列方式以及组织支架。
在正常组织中，细胞的数量、核大小、胞质占比、间质分布均存在固定模式，形成稳定的形态学参照。当发生炎症、增生、肿瘤、坏死等病变时，这套有序的结构会发生改变：细胞核可能出现增大、深染、核形不规则、核分裂增多；细胞排列紊乱，间质出现水肿、纤维化、炎细胞浸润等改变。借助这张由蓝紫与粉红构成的微观视觉地图，可识别组织结构异常。
这套色彩编码体系具备高度可重复性，不同实验室、不同操作人员在规范操作下，均可获得稳定的染色结果。全球病理科共享同一套 HE 染色判读标准，不同地区研究人员可以直接对照 H&E 切片交流形态学发现，这正是其被称为病理 “基础语言” 的核心原因。
HE 染色历经百余年发展，至今仍是病理诊断的基石。其优势体现在多方面：染色流程成熟、成本可控、重复性好，能够同时显示细胞核与细胞外基质两大核心组分，完整呈现组织架构。
免疫组化、原位杂交、二代测序等先进技术能够提供蛋白表达、基因层面信息，但这类检测均需要以 HE 切片的形态学观察为前提。脱离 HE 形态学评估，分子检测与免疫标记的结果将失去组织定位的形态学参照。
高品质即用型H&E染色液，适配石蜡切片、冰冻切片、细胞样本，支持人、动物、畜牧、水产多类样本实验。配方不含氧化汞、甲醇，安全低毒，不易产生沉淀，试剂可重复使用，染色色彩鲜亮稳定。